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關(guān)于細(xì)胞因子ELISA試劑盒的五種檢測(cè)辦法
發(fā)布時(shí)間： 2019-09-29 點(diǎn)擊次數(shù)： 3806次細(xì)胞因子ELISA試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗體ELISA檢測(cè)。ELISA是研究蛋白抗體的重要辦法。它采用抗原與抗體的特異反響將待測(cè)物與酶進(jìn)行直接或直接結(jié)合，然后通過酶與底物發(fā)生顏色反響，進(jìn)行定性和定量分析。接下來我們來介紹細(xì)胞因子ELISA試劑盒的五種檢測(cè)辦法。
一、直接法
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使用了二抗添加信號(hào)強(qiáng)度，也使抗體的挑選多樣化，可是直接法簡(jiǎn)單發(fā)生穿插反響。直接法只能用于測(cè)定抗體，首要用于疾病的診斷，其優(yōu)點(diǎn)是只需要改變包被抗原，酶標(biāo)抗體是通用的。
二、捕獲法
全稱捕獲包被法也稱為反向直接法，首要用于測(cè)定血清中某類抗體亞型如IgM。為掃除血清中IgG的攪擾，用抗IgM抗體包被后用于捕捉樣本中的IgM，然后加入特異性結(jié)合抗原進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。在測(cè)定IgM的試驗(yàn)中常遭到類風(fēng)濕因子（RF，一種能結(jié)合多種動(dòng)物IgG Fc的自身IgM抗體）的攪擾，導(dǎo)致假陽性反響。采用F(ab')或Fab片段制備酶標(biāo)抗體可以消除RF的攪擾，這一辦法在雙抗體夾心法中也具有同樣的功效。
三、競(jìng)爭(zhēng)法
是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的分析辦法。當(dāng)游離抗體（或抗原）濃度越高，則能與固定抗原（或抗體）結(jié)合的酶標(biāo)抗體（或抗原）就越少，后續(xù)顯色就越淺，即與對(duì)照比較，顯色越淺，表示檢測(cè)樣本中抗體（或抗原）含量越高。該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測(cè)也可用于檢測(cè)比較不純的樣本，且重復(fù)性好，可是檢測(cè)的靈敏度和專一性較差。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原常用于檢測(cè)小分子抗原及半抗原，這類抗原一般缺少兩個(gè)以上的識(shí)別位點(diǎn)，不適用于雙抗夾心法進(jìn)行測(cè)定。
四、直接法
僅需要抗原和酶標(biāo)一抗，操作簡(jiǎn)潔，可防止穿插反響，可是該辦法要求酶標(biāo)一抗有較高的特異性要求，一起也并非所有的一抗適合標(biāo)記處理。直接法在實(shí)際運(yùn)用中并不多見，它并不能對(duì)樣本中抗體進(jìn)行定量分析，因?yàn)闃颖局锌贵w是非酶標(biāo)抗體，無法進(jìn)行后續(xù)顯色，可是該法經(jīng)過改進(jìn)便是競(jìng)爭(zhēng)法。