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研域解析：怎么挑選適宜的HA標(biāo)簽抗體？
發(fā)布時(shí)間： 2019-08-29 點(diǎn)擊次數(shù)： 2165次HA標(biāo)簽系統(tǒng)運(yùn)用一個(gè)HA流感血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽交融到方針蛋白。HA標(biāo)簽可坐落蛋白質(zhì)的C端或N端，該系統(tǒng)已廣泛運(yùn)用于多種細(xì)胞類型，相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛運(yùn)用。
HA標(biāo)簽抗體能特異辨認(rèn)C末端或N末端帶有HA標(biāo)簽(HA-tagged)的交融蛋白，也可以用于檢測(cè)和HA tag交融表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)ding位，以及純化、定性或定量檢測(cè)HA tag交融表達(dá)蛋白等。
挑選適宜HA標(biāo)簽抗體需求考慮的要素
咱們?cè)谔暨x一個(gè)標(biāo)簽抗體時(shí)，主要依據(jù)自己試驗(yàn)運(yùn)用上的需求。這里需求考慮的要素包含，HA抗體的運(yùn)用檢測(cè)類型、HA抗體的克隆性及制備來(lái)源等。比方該HA抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測(cè)？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP試驗(yàn)？是否需求HRP偶聯(lián)的單克隆HA標(biāo)簽抗體？仍是一個(gè)兔來(lái)源的HA多抗更適宜？
一般來(lái)說(shuō)，運(yùn)用類型越多，在運(yùn)用過(guò)程中的挑選余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性都要優(yōu)于多克隆抗體，而多克隆。另外，抗體的效價(jià)也是考察該抗體性價(jià)比的重要方面，也即相當(dāng)于實(shí)際運(yùn)用時(shí)的稀釋比率。
一個(gè)效價(jià)高的100μl HA抗體（假如其WB檢測(cè)的稀釋比率是1:5000，終究運(yùn)用液相當(dāng)于500ml），要比效價(jià)低的1ml的HA抗體（假如WB檢測(cè)的稀釋比率是 1:200，終究運(yùn)用液相當(dāng)于200ml）性價(jià)比更高。因此在挑選抗體的時(shí)分，不光需求考慮抗體的量，還需求考慮抗體的效價(jià)，即不同運(yùn)用的主張稀釋比率。