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如何選擇合適的HA標(biāo)簽抗體？
發(fā)布時(shí)間： 2019-05-28 點(diǎn)擊次數(shù)： 2020次HA標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)HA (流感病du血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標(biāo)蛋白。HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端，該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞類(lèi)型，相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛應(yīng)用。HA標(biāo)簽抗體能特異識(shí)別C末端或N末端帶有HA標(biāo)簽(HA-tagged)的融合蛋白，也可以用于檢測(cè)和HA tag融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)ding位，以及純化、定性或定量檢測(cè)HA tag融合表達(dá)蛋白等。
我們?cè)谶x擇一個(gè)標(biāo)簽抗體時(shí)，主要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。這里需要考慮的因素包括，HA抗體的應(yīng)用檢測(cè)類(lèi)型、HA抗體的克隆性及制備來(lái)源等。比如該HA抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測(cè)？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP實(shí)驗(yàn)？是否需要HRP偶聯(lián)的單克隆HA標(biāo)簽抗體？還是一個(gè)兔來(lái)源的HA多抗更合適？
一般來(lái)說(shuō)，應(yīng)用類(lèi)型越多，在使用過(guò)程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性都要優(yōu)于多克隆抗體，而多克隆。另外，抗體的效價(jià)也是考察該抗體性價(jià)比的重要方面，也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時(shí)的稀釋比率。一個(gè)效價(jià)高的100μl HA抗體（假如其WB檢測(cè)的稀釋比率是1:5000，終使用液相當(dāng)于500ml），要比效價(jià)低的1ml的HA抗體（假如WB檢測(cè)的稀釋比率是 1:200，終使用液相當(dāng)于200ml）性價(jià)比更高。因此在選擇抗體的時(shí)候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價(jià)，即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。
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